วัสดุและวิธีการ ศึกษาประชากร เราวางแผนการศึกษากลุ่มประชากรตามรุ่นเชิงสังเกตที่เปรียบเทียบสองกลุ่ม: ผู้ป่วย ESKD ในการฟอกไตและอาสาสมัครที่มีสุขภาพดี (HP) ผู้เข้าร่วมทั้งหมดที่ลงทะเบียนในการศึกษานี้ต้องมีอายุมากกว่า 18 ปี พวกเขาต้องลงนามในหนังสือยินยอมที่ได้รับแจ้ง และพวกเขาได้รับการฉีดวัคซีนด้วยวัคซีน mRNA BNT162b2 (Comirnaty, Pfizer) เฉพาะผู้ป่วยที่ได้รับการฟอกไตเป็นเวลาอย่างน้อย 3 เดือนเท่านั้นที่รวมอยู่ในการศึกษา ไม่รวมบุคคลที่พัฒนาการติดเชื้อ SARS-CoV-2 ในระหว่างการศึกษา และทดสอบโดยการวิเคราะห์ระดับโมเลกุลของผ้าเช็ดจมูกในช่องจมูก

 

มีผู้เข้าร่วมการศึกษาทั้งหมด 155 DP ในขณะที่อาสาสมัคร 77 HP เป็นประชากรที่มีสุขภาพดี โปรโตคอลการศึกษาได้รับการตรวจสอบและอนุมัติโดยคณะกรรมการจริยธรรมแห่งชาติ Istituto Nazionale Malattie Infettive Lazzaro Spallanzani (การอนุญาตหมายเลข 6 ของการลงทะเบียนการทดลองในปี 2022)

 

ตัวอย่างเลือด ศูนย์ฟอกไตทั้ง 7 แห่งที่เข้าร่วมการศึกษาได้จัดเตรียมตัวอย่างเลือดและข้อมูลทางคลินิกสำหรับผู้ป่วยทุกราย (Dialysis Srl – Avellino, Capodicasa Srl – Avellino, Irpinia Dialisi Srl – Pratola Serra [AV], Padre Pio Srl – Benevento, Neoren Srl – Montesarchio [BN ], Sanniomedica Srl – Telese Terme [BN] และ Alta Irpinia Srl – Calitri [AV]) ศูนย์เหล่านี้ตั้งอยู่ในพื้นที่ทางภูมิศาสตร์เดียวกัน (เมือง Irpinia และ Sannio ซึ่งเป็นภูมิภาค Campania ทางตอนใต้ของอิตาลี) ซึ่งมีสภาพแวดล้อมและภูมิอากาศที่คล้ายคลึงกัน เก็บตัวอย่างเลือดก่อนฉีดวัคซีนและในช่วงเวลาที่กำหนด เช่น ภายใน 0-15, 16-21 (ขนาดวัคซีนที่สอง), 22–32, 33–45, 46–60, 61–120 และ >120 วันหลัง การฉีดวัคซีน (DPV) สำหรับ DP เท่านั้น เก็บตัวอย่างเลือดภายใน 30-60 วันหลังจากฉีดวัคซีนกระตุ้น (วันหลังการให้วัคซีน DPB)

 

การหาปริมาณแอนติบอดีสัมบูรณ์ ระดับ IgG ได้รับการประเมินโดยใช้ COVID-19 QuantiGEM SARS-CoV-2 IgG ELISA Kit CE-IVD ซึ่งพัฒนาโดย Biogem ตามคำแนะนำของผู้ผลิต โดยสังเขป ตัวอย่างซีรัมจาก HP และ DP ได้รับการทดสอบหลังจากการเจือจาง 1:250; สำหรับตัวอย่างที่มีความหนาแน่นเชิงแสงเหนือขีดจำกัดบนของการหาปริมาณ มีการใช้การเจือจางที่สูงขึ้น (1:500 หรือ 1:1,000) COVID-19 QuantiGEM SARS-CoV-2 IgG ELISA Kit ช่วยให้สามารถหาปริมาณสัมบูรณ์ของ anti-SARS-CoV-2 IgG ได้โดยใช้กราฟเทียบมาตรฐานด้านลอจิสติกส์ (4-PL) ความเข้มข้นของแอนติบอดีถูกแสดงออกเป็นทั้งหน่วยโดยพลการต่อมิลลิลิตร (AU/mL) และนาโนกรัมต่อมิลลิลิตร (ng/mL) ตามที่คำนวณโดยการประมาณค่าด้วยเส้นโค้งมาตรฐาน มีการตีความผลการทดสอบตามคำแนะนำของผู้ผลิต: ตัวอย่างมีค่าเป็นลบหากระดับแอนติบอดี <0.120 AU/mL